ÿþAttivazione di ASIC mediante pH converse all star acido esterno. A, corrente rappresentativa di acido Na rappresentata con potenziale di trattenimento di -60 mV in un ovocita. La linea continua sopra la traccia mostra il periodo di applicazione del pH acido (10 s). B, corrente rappresentativa interna di Na in un ovocita che esprime ASIC1a / 2a. La distanza indicata dalla coppia di frecce sinistra è il tempo necessario per raggiungere la corrente di picco (vedi "Procedure sperimentali"). La linea tratteggiata sovrapposta alla traccia è stata prodotta adattando il componente della corrente di sensibilizzazione con una funzione di decadimento esponenziale del primo ordine per calcolare la costante di tempo di inattivazione (Ä i).

Le correnti non si sono saturate a concentrazioni di Na comprese tra 0 e 100 m m. Non abbiamo misurato correnti a concentrazioni di Na più elevate perché l'aumento dell'osmolarità della soluzione cambierà il volume cellulare, che probabilmente attiverà gli ASIC, che sono sensibili agli stimoli meccanici (17). Il motivo per cui CFTR ha converse platform aumentato l'interazione del Na con il canale ASIC1a / 2a non è noto. Il CFTR può aumentare la probabilità aperta e l'espressione ASIC. L'espressione ENC negli ovociti porta ad un aumento della concentrazione citoplasmatica di sodio accompagnata da un potenziale di membrana depolarizzata a causa dell'attività costitutiva del canale.

Pertanto, le correnti di cellule intere converse off white misurate nei nostri esperimenti erano molto inferiori ai minimi 50 ¼A / ovocita Nagel et al. (52) calcolato che renderebbe problematico il bloccaggio della tensione. Inoltre, la resistenza in serie dell'elettrodo di riferimento, dei ponti di agar e della soluzione da bagno è stata di meno di 1 k©, sempre inferiore ai 20 k© assunti da Nagel et al. (52). Pertanto, la resistenza totale in serie era molto inferiore (<�4%) rispetto a quella della membrana e non poteva quindi introdurre un errore significativo nelle misurazioni della tensione. Anche supponendo che la sovraespressione di CFTR abbia provocato un cambiamento nella resistenza di accesso e, quindi, abbia prodotto una caduta converse bianche di tensione significativa nel bagno, non può tenere conto degli effetti opposti di CFTR su ENaC e ASIC.

Pertanto, la sovraregolazione degli ASIC da parte del CFTR è improbabile a causa di un aumento del citoplasmatico Ca 2 perché gli effetti del citoplasmatico Ca 2 e la regolazione del CFTR sui canali omicultimerica ASIC1a e ASIC2a e il canale eteromultimico ASIC1a / 2a non sono gli stessi (49) Anche nel caso della regolamentazione CFTR dell'ENaC, sono state documentate diverse osservazioni nei tessuti epiteliali. Il canale epiteliale del Na situato nella membrana apicale è attivato nelle vie aeree, polmonari, intestinali, epitelio renale e nei sistemi di espressione eterologa (per la revisione, vedere Rif.13.13-16).

Ma il puzzle è ancora irrisolto. Sebbene gli ASIC siano membri della famiglia ENaC / DEG, ci sono differenze nelle caratteristiche biofisiche e farmacologiche tra ENaC e ASIC, tra cui la loro sequenza molecolare, selettività cationica, conduttanza unitaria, comportamento gating, sensibilità all'amiloride, ecc. Inoltre, le loro risposte a regolatori o modulatori (ad esempio protoni, Ca 2, Mg 2, Na, neuropeptidi, acidi monocarbossilici, infiammazione, ischemia globale, ecc.) sono diversi, anche opposti (per la revisione, vedere Rif. 17 e 58). Non è stata testata la possibilità che la diversa funzione e regolamentazione tra ASIC ed ENaC possano contribuire alle loro diverse interazioni con CFTR.

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